нный тип липидов с особыми белками. Такие специфические липиды необходимы, в частности, для активации (реактивации) мембранных ферментов; они выступают здесь в качестве аллосте-рических эффекторов. Так, белковую молекулу Na+, К+-АТФа-зы окружает кольцевой слой липидов из 30-32 молекул. Применение разнообразных физических методов показало, что кольцевые (аннулярные) липиды могут многократно обмениваться с общим липидным пулом мембраны. Время обмена таких прочно связанных липидов с соседними молекулами составляет 10~4 — 10~5 с. Это несоизмеримо меньше продолжительности одного ферментного цикла. Кроме того, оказалось, что сама фракция кольцевых липидов очень гетерогенна по своей обме-ниваемости, по фазовому состоянию и по способности к реактивации белка. Как минимум, роль кольцевых липидов заключается в поддержании строго определенного гидрофобного окружения данного белка.

В области температурных фазовых переходов таких липидов отмечается изменение каталитических и транспортных свойств белков. Общая доля кольцевых липидов довольно велика — около 20%. Доказано, что можно изменять активность мембранных белков изменением связанных с ними липидов.

Другой пул липидов, удаленных от белков и подвергающихся быстрой латеральной диффузии, характерной для билипидного слоя, не пронизанного белком, составляет около 80%. Действие этих липидов на мембранные белки аналогично растворяющему эффекту воды на свойства растворимого белка.

Приведем примеры функциональной роли индивидуальных липидов в мембранах ЦНС. В табл.4.5 представлены данные о влиянии различных фосфолипидов на активность мембранных ферментов.

109

Таблица 4.5.

Активирование отдельными фосфолипидами мембранных

ферментов

Фермент Фосфолипиды *

Na+, К+-АТФаза ФХ, ФС, ФЭ, ФИ, ЛФХ, СМ

Протеинкиназа С ФС

Аденилатциклаза ФС, ФИ

Ацетилхолинэстераза Ненасыщенная жирная кислота в составе фосфолипидов

Моноаминоксидаза ФХ

Галактозилнерамидаза ФС

*ФХ — фосфатилхолин; ФС — фосфатилсерин; ФЭ — фосфатилэтаноламин; ФИ — фосфатилинозитид; ЛФХ — лизофосфатидилхолин; СМ — сфингомие-лин.

4.6. УЧАСТИЕ ЛИПИДОВ В РЕЦЕПЦИИ И ПЕРЕДАЧЕ ВНУТРЬ КЛЕТКИ СИГНАЛА

Межклеточные контакты, без которых немыслима деятельность ЦНС, обеспечивают постоянную передачу информации через плазматическую мембрану. Эта передача не может не касаться билипидного слоя. Процесс передачи информации через мембрану включает рецепцию внешнего химического сигнала и трансформацию его во внутриклеточный эффект.

Возникает вопрос, принимают ли участие липиды бислоя в рецепции внешних сигналов. В последнее десятилетие установлено, что сульфоцереброзиды (сульфатиды) играют довольно специфическую роль в рецепции опиоидов. Частично очищенный препарат рецептора опиоидов содержит высокую концентрацию сульфатидов. Предполагают, что сульфатная группа це-реброзидсульфата входит в состав или соседствует с активным центром опиатных рецепторов, который имеет белковую природу. Возможно, что взаимодействие опиатов с цереброзидсульфатами выполняет вспомогательную функцию, способствуя сосредоточению лигандов в области центра белковой природы. ПО

При исследовании ряда кислых липидов только сульфатиды проявляли наивысшее сродство к опиатам в различных физиологических условиях. Доказательством важной роли сульфати-дов в рецепции опиоидов может служить и тот факт, что антитела к цереброзидсульфату, введенные в мозг крысы, снимали наркотическое действие морфина.

Если липиды бислоя могут быть участниками процесса рецепции, то естественно ожидать их участия в каскаде реакций, возникающих после активации рецепторов. М.Н.Хокин и Л. Э.Хокин (1953) впервые связали холинергическую стимуляцию с усилением обмена фосфатидилинозита и фосфатидной кислоты. Явление получило название "фосфолипидного эффекта"; этот термин сейчас заменен на термин "фосфоинозитид-ный эффект", поскольку появилось большое число работ, показывающих именно их регуляторную роль в транспорте вторичного мессенджера — ионов кальция — через мембраны.

Содержание фосфоинозитидов в мембранах ЦНС не превышает 0,5-2% от общих липидов, локализованы они преимущественно в плазматических мембранах, в миелине (до 95% всех фосфоинозитвдов мозга), в эндоплазматическом ретикулуме, наружной митохондриальной и ядерной мембранах. В состав фосфоинозитидов (от 1 до 18%) входит арахидоновая кислота, являющаяся важным источником простагландинов. Деполяризация мембраны приводит к быстрому высвобождению арахидо-новой кислоты именно из фосфоинозитидов. Р.Митчелл (1975) высказал гипотезу (полностью подтвердившуюся в дальнейшем) о прямой связи расщепления фосфоинозитидов с рецепторным аппаратом клетки и увеличением внутриклеточной активности. В синаптосомах стимуляция части мускариновых и ах-адренерги-ческих рецепторов обусловливает фосфоинозитидный эффект, сопровождающийся изменением проницаемости плазматической мембраны для ионов кальция.

Участие фосфоинозитидов и продуктов их обмена в регуляции транспорта кальция осуществляется несколькими путями:

1) при распаде фосфатидилинозитидов образуется 1,2-диа-цилглицерин, стимулирующий активность протеинкиназы С, которая, в свою очередь, фосфорилирует белок Са-каналов и некоторые другие белки;

2) трифосфоинозитол, освобождающийся при расщеплении фосфатидилинозитидов, обладает высокой способностью связывать двухвалентные катионы; по этой причине он индуцирует мобилизацию мембранно-связанного кальция;

111

3) инозитол-трифосфат способен также повышать уровень внутриклеточного кальция за счет открытия кальциевых каналов эндоплазматического ретикулума. Таким образом, происходит сопряжение выброса кальция из внутриклеточных мест хранения с входом кальция через мембраны.

До включения описанного механизма концентрация свободного кальция в цитоплазме нейрона составляет примерно 1-.10~7М. Концентрация кальция снаружи нейрона в десятки тысяч раз выше. Мобилизация Са2+ из внутриклеточных и внеклеточных источников в сотни-тысячи раз повышает его уровень в цитоплазме. Повышенный уровень Са2+ служит активатором ряда процессов, в том числе некоторых протеинкиназ.

На молекулярном уровне передача этого сигнала через мембрану осуществляется цепочкой мембранных белков, последовательно взаимодействующих друг с другом для передачи сигнала малым молекулам, находящимся в цитоплазме. Информация от рецептора на поверхности клетки передается так называемому G-белку, который активирует фермент фосфодиэсте-разу, расщепляющую трифосфоинозитид до инозитол-1,4, 5-трифосфата и 1,2-диацилглицерина. Инозитолтрифосфат растворим в воде, диффундирует в цитоплазму, где и вызывает описанное выше освобождение кальция. Освободившийся кальций участвует в активации протеинкиназ.

Липофильный диацилглицерин, отличный по своему жирно-кислотному составу от стабильного пула диацилглицеринов, остается в мембране, изменяет ее текучесть и, как уже упоминалось, активирует мембранно-связанную протеинкиназу С,

Эти две различные ветви фосфоинозитидного цикла ведут в конечном счете к фосфорилированию двух различных наборов белков. Оказалось, что с помошью активирующих веществ каждую из ветвей цикла можно привести в действие независимо друг от друга. С другой стороны, применение сочетанного действия фор-боловых эфиров и кальциевых ионофоров помогло установить синергизм двух сигнальных ветвей инозитидного цикла. В таком раздвоенном сигнальном пути совместным действием веществ можно запустить большое число внутриклеточных процессов.

В дальнейшем образовавшиеся 1,2-диацилглицерин и инозитолтрифосфат подвергаются химическим превращениям, требующим АТФ и ЦТФ и приводящим к восстановлению три-фосфоинозитида. Таким образом, цикл замыкается и уровень полифосфоинозитидов в мембране восстанавливается.

112

4.7. МИЕЛИН В ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЕ

Мозг человека содержит 120 г миелина, что составляет одну треть его сухой массы. Миелин — уникальное образование, организация которого позволяет проводить импульс в аксоне с минимальной затратой энергии. Миелиновая оболочка — высокоорганизованная многослойная структура, состоящая из сильно растянутой и модифицированной плазматической мембраны олигодендроглиальной клетки.

Рис.4.1. Мезаксон и образование многослойной миелиновой

мембраны

Плазматическая мембрана олигодендроцита образует вокруг аксона сложную мембранную структуру — мезаксон, который является элементарной единицей миелина, имеет пятислойную структуру: белок-липид-белок-липид-белок (рис.4Л) . Эта пя-тислойная структура, многократно закручиваясь вокруг аксона,

113

конденсируется в компактную миелиновую оболочку. На электронных микрофотографиях миелин представляет собой серию чередующихся липидных и белковых слоев, число таких слоев у крупных аксонов может достигать 250. Сплав цитоплазматиче-ских поверхностей мембраны олигодендроцита образует главный период (темная линия), а сплав экстраклеточных поверхностей — половинный или промежуточный период (более светлая линия), который часто виден в виде двойной линии. Это указывает на то, что взаимопроникновение белков экстраклеточных поверхностей мембран не было полным (рис.4.2).

md

Рис.4.2. Главный (md) и промежуточный (ip) период в многослойной миелиновой мембране

Повторяющийся период миелина определяется толщиной составляющего его липидного бислоя, "зажатого" двумя белковыми слоями, и равен 15-16 нм (рис.4.3). Белки, частично пронизывающие бислой, занимают 5-10% площади; распределение его по поверхности бислоя неравномерно — есть области, не занятые белком. Полярные группы липидов образуют слой толщиной в 1 нм, а гидрофобная область занимает 3,3-3,8 нм.

114

Из всех существующих мембран миелин имеет самое низкое содержание воды и самое высокое отношение липидов к белку. В миелине (в %) белка — 15-30, липидов — 70-85 на сухую

Электронная плотность

\ х

! пг \

мгестл

j | стр.

! !

k-1-

гибкая цепь

липиды

белок

I

пг

стр. I I

I I I I -1—»)

ill II

Рис.4.3. Схема структуры двойного мембранного слоя миелина (пг - полярные группы, жест. стр. — область, где эфиры