с-НС1 0,1 М НС1

8,5 мл 36%-иой НС1+ 991,5 мл Н20 0,1 М трнс

(оксиметнламинометан) 12,1 г/л

Количество компонента А, мл

рн фосфатный буфер трнс-HCl буфер

6,0 6,2 6,4 6,6 6,8 7,0 7,2 7,4 7,6 7,8 8,0 61,5 92,5 132,5 187,5 245,0 305,0 360,0 405,0 435,0 457,5 473,5 221,0 207,0 192,0 162,5 134,0

Количество компонента Б, мл 500—А 500

Довести до объема дистиллированной водой 1 л 1 л

Физиологический раствор

Готовят 0,85%-ный раствор NaCI в дистиллированной воде. При необходимости стерилизуют 30 мин при \{ атн.

Подготовка предметных и покровных стекол для приготовления препаратов

Предметные и покровные стекла считаются чистыми, когда капля воды растекается по нх поверхности. Новые стекла обычно кипятят в I % -ном растворе соды, промывают дистиллированной водой, слабым раствором соляной кислоты и затем опять дистиллированной водой. Стекла, бывшие в употреблении, кипятят в мыльной воде и затем не менее суток выдерживают в растворе хромовой смеси. От бихромата стекла отмывают дистиллированной водой Чистые стекла хранят в 96°-ном этаноле.

Обработка предметных стекол по Цеттнову

1. Стекла кипятят 10 мин в следующем растворе: бихромата калия — 20 г;

дистиллированной воды — 200 мл; концентрированной серной кислоты — 20 мл.

2. Промывают в течение 5 мид слабым раствором едкого натра.

3„ Тщательно промывают водой.

4. Промывают спиртом.

При отсутствии заранее приготовленных обезжиренных стекол можно быстро» подготовить стекла, натирая их в сухом виде хозяйственным мылом и очищая затем чистой хлопчатобумажной тканью.

Средства для мытья посуды

Хромовые смеси. 1. В концентрированную серную кислоту добавляют около-5% (от объема серной кислоты) размельченного в порошок кристаллического двухромовокислого калия (К2СГ2О7) и осторожно нагревают в фарфоровой чашке на водяной баие до его растворения.

2. Двухромовокислый калий растворяют в воде, затем в раствор осторожно-добавляют серную кислоту. Смесь тотовят нз расчета: вода —? 100 мл;двухро-мово-кислый калий — б г; серная кислота (плотность 1,84) — 100 мл.

После многократного употребления темно-оранжевый цвет хромовой смеси меняется на темно-зеленый. Такая смесь не обладает моющнмн свойствами. Хромовой смесью не следует мыть посуду, загрязненную парафином, керосином, минеральными маслами и другими продуктами перегонки нефтн.

Хромовая смесь сильно разрушает ткани животного и растительного происхождения, поэтому работать с ней следует осторожно. Если она попала на руки илн одежду, то пораженное место немедленно обмывают большим количеством воды, затем разбавленным раствором аммиака илн соды, а затем снова водой.

Спиртовой раствор КОН — также хорошее моющее средство. Его готовят растворением 40—50 г КОН в 500 мл воды. После остывания раствора к нему добавляют спирт-сырец в таком количестве, чтобы общий объем составил 1 л.

ЛИТЕРАТУРА

АйалаФ., Кайгер Дж. Современная генетика. М.: Мир, 1987:

Б а б ь е в а И. П., А г р е Н. С. Практическое руководство по биологии почв. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1971.

Б а б ь е в а И. П., Голубев В. И. Методы выделения и идентификации дрожжей. М.: Пищевая пром-ть, 1979.

Блохина И. Н., Леванова Г. Ф., Антонов А. С. Систематика бактерий (с основами геносистематики), Н. Новгород, 1992.

Водоросли. Справочник/ Вассер С. П., Кондратьева Н. В:, Маслюк Н; Б:

Киев, 1989. „ .

Г л а з е р В. М., 3 н н ч е н к о В. В., IK а м е н е в а С. В: Большой практикум по генетике микроорганизмов. М.: Изд-во Моск. ун-та, 11985.

Громов Б. В. Строение бактерий. Л., 1985.

Громов Б. В., Павленко Г. В. Экология бактерий: Л:, 1989: Гусев М. В., Ми нее в а Л. А. Микробиология: М:: Изд-во Моек: ун-та,

1992.

Егоров Н. С. Основы учения об антибиотиках. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1994.

Зубжицкий Ю. Н. Метод люминесцентной микроскопии. Л.: Медицина,

1964.

Каталог культур микроорганизмов. Институт биохимии и физиологии микроорганизмов РАН, Всероссийская коллекция микроорганизмов. Пущино-иа-Оке: Наука, 1992.

КожевинП. А. Микробные популяции в природе. М.: Изд-во Моек: ун-та,

1984.

Краткий определитель бактерий Берги. М.: Мир, 1980.

Кузнецов С. И., Дубинина Г. А. Методы изучения водных микроорганизмов. М.: Наука, 1989.

Курс низших растений/Под ред: М. В. Горленко. М.: Высшая школа,, 1981: Л ь ю и н Б. Гены. М.: Мир, 1987.

М а з и н А. В. Методы современной генетики и генной инженерии. Новосибирск, 1990.

Максимов В. Н. Многофакторный эксперимент в биологии. М.: Изд-во Моск. уи-та, 1980.

Международный кодекс ботанической номенклатуры/Под ред. Ф.А. Стафле и др. Л.: Наука, 1980.

Международный кодекс номенклатуры бактерий. М.: Мир, 1980. Методы общей микробиологии/Под ред. Ф. Герхардта/ М.: Мир 1983. Т. 1—3.

Методы почвенной микробиологии и биохимии /Подред.Д. Г. Звягинцева М.: Изд-во Моск. ун-та, 1991.

Миллер Дж. Эксперименты в молекулярной генетике. М.: Мир, 1976. Практикум по микробиологии /Под ред. Н. С. Егорова. М.: Изд-во Моск. Ун-та, 1976.

Промышленная микробиология/ Под ред. Н, С. Егорова. М.: Высшая школа,

1989.

Световая микроскопия в биологии. Методы/Под ред. А. Лейси: М.: Мир,

1982.

Семенов С. М. Лабораторные среды для актиномицетов и грибов. М.: Агропромиздат, 1990.

СтейниерР., ЭдельбергЭ., Иигрэм Дж. Мир микробов: М.з Мир, 1979. Т. 1—3.

Стент Г., КэлиндарР. Молекулярная генетика. М.: Мир, 1976.

Теппер Е. 3., Шильннкова В. К., Переверзева К. И. Практикум по микробиологии: М.: Колос, 1994.

Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих. М.: Мир, 1975. Щлегель Г. Общая микробиология. М.: Мир, 1986.

Bergey's Manual of Determinative Bacteriology. 9th ed/Eds J. G. Holt et al. Baltimore, 1993.

Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. Vol. 1—4. 8 th ed. Baltimore, 1984, 1986, 1989.

S t a n i e r R. Y., Ingraham J. L„ W h a e 1 i s M; L:, P a i n t e r P: Rj The Microbial World. 5 ed. Prentice — Hall, Englewood Cliffs, 1986.

The Prokaryotes. A Handbook on the Biology of Bacteria: Ecophysiology, Isolation, Identification, Application. 2 nd Ed/ Eds A. Balows et al. Berlin: Heidelberg; New York: Springer—Verlag, 1992. Vol. 1—4.

The Yeasts. A taxonomic Study. Amsterdam, 1984.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Из предисловия к первому изданию 3"

Из предисловия к третьему изданию 3

Глава 1. Общая характеристика микроорганизмов 5

1.(1. Прокариоты 6

1.2., Эукариоты 13

1.3. Влниние физических и химических факторов на рост

микроорганизмов , 18

il.4. Обмен веществ 19

,1.5, Микроорганизмы в природе и биотехнологии 20

Глава 2. Микробиологическая лаборатория и правила работы в ней 22

2.1. Подготовка микробиологической лаборатории к работе 23

2.2. Правила работы с культурами микроорганизмов 24

Глава 3. Методы стерилизации 29

3.1. Стерилизация питательных сред 29

3.2. Стерилизация стеклянной посуды ...( 37

3.3. Стерилизация инструментов и приборов 38

Глава 4. Культивирование н хранение микроорганизмов 434.1, Принципы составления сред для культивирования

микроорганизмов 43

4.2. Условия культивирования микроорганизмов 56

4.3., Хранение микроорганизмов k 65

Глава 5. Выделение чистых культур микроорганизмов 71

5.1. Получение накопительной культуры 71

5.2. Выделение чистой культуры 73

5.3. Определение чистоты выделенной культуры 60

Глава 6. Морфология и цитология микроорганизмов 81

6.1. Микроскопия 81

6j2. Изучение микроорганизмов в световом микроскопе 97

6.3. Приготовление препаратов для люминесцентной микроскопии 112

6.4. Методы приготовления препаратов микроорганизмов

для электронной микроскопии 114

Глава 7. Количественный учет микроорганизмов 117

7.1. Определение количества клеток 117

7.2. Определение биомассы взвешиванием 129

7 3. Определение количества клеток и биомассы нефелометрнческим методом 130

Глава 8. Определение состава клеток микроорганизмов 133

8il. Методы разрушения клеток 133

8 2. Определение белка 138

8.3. Анализ нуклеиновых кислот 142

8.4. Определение полн-р-окоимасляной кислоты (ПБОМК) 147

8.5. Выделение и анализ полисахаридов 147

8.6. Изучение состава клеточных стенок микроорганизмов. 148

Глава 9. Культуральиые и физиолого-биохимические свойства микроорганизмов 151

9.1. Культуральиые свойства 151

9.2. Физиолого-биохимические свойства 155

Глава 10. Генетика микроорганизмов 172

10.1. Основные понятия 173

10.2. Мутагенез 173

10.3. Отбор мутантов 179

10.4. Перенос генетической информации у бактерий 182

Глава 11, Систематика и идентификация микроорганизмов 189

ПЛ. Основные понятия и правила наименования 189

11.2, Описание н идентификация 193

Приложение

Среды для культивирования различных микроорганизмов 202

Условия хранения и допустимые сроки периодических пересевов некоторых гетеротрофных микроорганизмов 208

Рецепты красителей, индикаторов и растворов 210

Литература 218

Учебное издание

РУКОВОДСТВО К ПРАКТИЧЕСКИМ ЗАНЯТИЯМ ПО

МИКРОБИОЛОГИИ

Зав. редакцией И. И. Щехура Редактор Г. М. Полехова Художественный редактор Л. В. Мухина Переплет художника Л, Е. Безруненкова Технический редактор Я. Я, Смирнова Корректоры И. В. Бабаева, В. В. Конкина

ИБ № 8168

ЛР № 040414 от 27.03.92

Сдано в набор 28.06.95. Подписано в печать 10.11.95. Формат 60X907is

Гарнитура литературная. Бумага офс. кн.-журн. Печать высокая.

Усл. печ. л. 14. Уч.-нзд. л. 15,71. Тираж 1000. Заказ 1356.

Ордена «Знак Почета» издательство Московского университета. 103009, Москва, ул. Б. Никитская, 5/7.

Серпуховская типография Упрполиграфиздата Мособлисполкома

проезд Мишина, д. 2/7