Биологический каталог




Методы общей бактериологии. Том 2

Автор Ф.Герхардт

ры обусловливают и степень разрешения

Таблица 16.4. Физические свойства некоторых радиоактивных

изотопов

при выявлении радиоактивности с помощью фотоэмульсий. В табл. 16.4 приведена информация об изотопах, наиболее часто применяемых в биологии. К сожалению, не получены радиоактивные изотопы азота и кислорода, пригодные для их использования в научных исследованиях. Чаще всего в биологических работах измеряют радиоактивность р-частиц (электронов) и у-лучей. р-Излу-чение, испускаемое, например, тритием и 14С, можно измерить с помощью соединенной с электрометром ионизационной камеры для подсчета импульсов в газе, счетчика Гейгера, а также методами пропорционального счета (обычно с карбонатом бария) или сцинтилляци-онного счета. Мы ограничимся описанием лишь жидкостного сцинтилляционного спектрометра, вытеснившего за последние годы все остальные счетные устройства. Счетчики, регистрирующие у-излучение, применяются в основном для измерения 1311 и 1251.

16.4.1. Обеспечение безопасности при работе с радиоактивными изотопами

Применение радиоактивных изотопов с любой целью строго регулируется Комиссией по ядерному контролю. В круг обязанностей основной организации, под руководством которой проводятся данные исследования, входят обычно выдача разрешений на использование тех или иных радиоактивных материалов и периодическое инспектирование работы лабораторий. Со своей стороны эта организация через сотрудника, ответственного за технику безопасности, требует от персонала лаборатории соблюдения всех принятых мер предосторожности и ведения учета радиоактивных материалов в соответствии с установленными правилами работы с радиоактивными изотопами. Ниже приведены основные из этих правил.

1. Исследования с применением того или иного радиоактивного изотопа следует проводить в специально предназначенном для этого лабораторном помещении. Для работы с летучими радиоактивными соединениями, например 3Н20, требуется отдельный отсек с вытяжным шкафом. Количество использованных материалов и уничтожение радиоактивных отходов необходимо конт16. ФИЗИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

ролировать. Приспособления для приема отходов, уборки рабочих мест и очистки инвентаря всегда должны быть в полной готовности.

2. На рабочем месте запрещается есть, пить и курить.

3. Нельзя всасывать жидкость в пипетку ртом.

4. Необходимо работать в специальной одежде, перчатках и защитных очках.

5. Все контейнеры с радиоизотопами должны быть снабжены специальными этикетками с указанием радиоактивности и других необходимых данных.

6. По возможности следует применять лабораторный инвентарь одноразового пользования и складывать его после проведения экспериментов в специальные контейнеры для твердых отходов.

7. Всю лабораторную стеклянную посуду перед ее использованием в обычных опытах следует тщательно промыть и проверить на радиоактивность.

8. Необходимо проводить регулярную инвентаризацию и регистрацию используемых изотопов.

9. Перед уходом из лаборатории следует проверить на радиоактивность рабочее место, одежду и руки.

10. В случае утечки радиоактивности об этом необходимо поставить в известность всех сотрудников лаборатории и ответственного за технику безопасности.

Счетчик Гейгера с тонкостенным окном позволяет обнаруживать все изотопы, за исключением трития, для регистрации которого требуется сцинтилляционный счетчик. При работе с источниками у-излучения с радиоактивностью свыше 100 мкКи, а также с 32Р и другими изотопами, испускающими жесткое р-излучение, персонал должен быть снабжен индикаторными пленками для обнаружения радиоактивности, В случае применения ИС, 3Н и 35S такие пленки не требуются. Однако лицам, использующим эти изотопы в количестве порядка милликюри, необходимо периодически делать анализ мочи. Организация таких анализов наряду с обеспечением лаборатории индикаторными пленками и средствами ликвидации отходов часто входит в обязанность сотрудника, ответственного за технику безопасности.

Детекторы радиоактивности следует защищать от загрязнения. Поэтому они должны находиться в специально отведенном для них помещении, причем особое

внимание необходимо уделять чистоте наружной стороны флаконов для подсчета импульсов; флаконы должны быть снабжены плотно закрывающимися крышками, предотвращающими утечку радиоактивности; при замене образцов нужно соблюдать большую осторожность, чтобы случайно не разбить флакон и не пролить жидкость. Работу с высоким и низким уровнями радиоактивности следует проводить в разных местах. По окончании эксперимента необходимо произвести уборку рабочего места. Стеклянную посуду и другой инвентарь нельзя оставлять грязными в не предназначенном для этого месте, чтобы их не могли использовать другие сотрудники. Старые радиоактивные материалы не следует считать распавшимися, до тех пор пока не будет доказано, что это не так.

Тритий и 14С в количествах, используемых в большинстве экспериментов, не представляют радиационной опасности. Вместе с тем 3Н20 — это летучее вещество, а газ 3Н2, применяющийся для введения метки, обладает очень высокой удельной активностью, что требует при обращении с ним особых предосторожностей. Хотя 14С испускает мягкое р-излучение, он имеет очень большой период полураспада (5000 лет), поэтому его включение в биологический материал, например в дезоксири-бонуклеиновую кислоту или кости, опасно из-за длительного воздействия. 35S и 32Р, имеющие относительно короткие периоды полураспада (87,1 и 14,3 дня соответственно), испускают жесткое р-излучение. При работе с большими количествами этих веществ следует находиться за радиационным укрытием (свинцовыми плитками) и следить за уровнем радиации на рабочем месте.

16.4.2. Экспериментальные методы

Чистота меченых соединений

Поставляемые коммерческими предприятиями меченые соединения обычно отличаются высоким качеством, причем следует помнить, что как радиохимическая, так и химическая чистота соединения может иметь решающее значение в предстоящем эксперименте. Поэтому необходимо убедиться по крайней мере в том, что примеси, если они присутствуют, не влияют на ход эксперимента.

Радиохимически чистое соединение содержит только один вид радиоактивной молекулы, но определение радиоактивной чистоты не дает никаких указаний на присутствие в этом соединении нерадиоактивных примесей. Радиохимическую чистоту данного соединения можно определить с помощью хроматографии и обратного изотопного разбавления (см. ниже), т. е. добавления такого же, но нерадиоактивного чистого соединения (носителя) с последующим выделением этого соединения и определением в нем удельной активности. Если исследуемое соединение радиохимически чистое, то его вновь определенная удельная активность совпадает со значением, ожидаемым при простом разбавлении его нерадиоактивным соединением. Если же в веществе содержатся радиоактивные примеси, то при его выделении вместе с носителем получится препарат, в котором уже не будет этих примесей, и его удельная активность окажется ниже ожидаемой. Если примесь нерадиоактивна, удельная активность выделенного препарата будет выше той, которая должна быть после разбавления носителем. В том случае, когда известно, что собой представляет примесь, ее концентрацию можно определить с помощью изотопного разбавления, т. е. добавления чистого нерадиоактивного вещества, присутствующего как примесь, с последующим выделением препарата и измерением его удельной активности. Химическую чистоту определяют обычными методами, такими, как спектрофотометрия, дисперсия оптического вращения, газожидкостная хроматография и т. д.

Радиохимическая и химическая чистота соединения может заметно изменяться при хранении, что обусловлено главным образом его радиационным повреждением вследствие высокой удельной активности препарата. Этот процесс можно свести к минимуму, выполняя как можно точнее специальные указания фирм-изготовителей или одно из следующих более общих правил. Препараты радиоактивных соединений необходимо; 1) хранить при самой низкой практически возможной удельной активности; 2) разделять на отдельные более мелкие партии; 3) если данный препарат представляет собой твердое вещество, то его нужно хранить в сухом состоянии; 4) хранить в вакууме или в атмосфере инертного газа;

5) хранить в чистом бензоле при 5—10°С; 6) к водорастворимым веществам, не растворяющимся в бензоле, добавлять этиловый спирт до концентрации 2—10%; 7) хранить при возможно более низкой температуре. Водные растворы 3Н-соединений не следует замораживать. Твердые вещества часто не требуется хранить под вакуумом или в атмосфере инертного газа, их можно держать в сухом состоянии в завинчивающихся флаконах. Ампулы с летучими материалами и жидкостями запаивают под вакуумом или в токе инертного газа.

Методы изотопного разбавления

Радиоактивные соединения можно использовать для определения количества тех же, но немеченых соединений, присутствующих в смеси с другими веществами. Для этого необходимо знать удельную радиоактивность (УР) и количество добавленного в смесь радиоактивного соединения. Затем из смеси выделяют какую-то часть очищенного соединения и определяют его удельную радиоактивность. Содержание немеченого соединения в смеси рассчитывают по уравнению

Количество немеченого соединения (Г) = Количество добавленного

VP

/ ч , , ?У*ИСХОДНДЯ .

радиоактивного соединения (г) X VD —

& "КОНЕЧНАЯ

Соединение считается чистым в том случае, когда удельная радиоактивность после нескольких повторных выделений препарата (или рекристаллизации) остается постоянной.

С помощью обратного метода можно измерить общее количество содержащегося в смеси радиоактивного соединения. Для этого к пробе добавляют очищенное нерадиоактивное соединение1 а затем его вновь выделяют. Исходная удельная радиоактивность соединения и количество нерадиоактивного носителя должны быть известны, а конечную удельную радиоактивность определяют после выделения из смеси препарата. Количество радиоактивного материала рассчитывают по формуле.

Количество неизвестного (радиоактивного) вещества (г) = Об

страница 41
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84

Скачать книгу "Методы общей бактериологии. Том 2" (4.15Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(21.10.2019)