Биологический каталог




Методы общей бактериологии. Том 3

Автор Ф.Герхардт

я каждого изучаемого параметра. Точность результата

Таблица 23.2. Поставщики биологических индикаторов

Тип индикатора

ПОСТАВЩИК (РАЗД. 23.6)

Полоска с нанесенными на иее спорами одного вида бактерий

Полоска со спорами бактерий двух видов

Полоска со спорами известной численности

Полоска со спорами и определенным количеством культуральной среды

Суспензия спор в культура льной среде

Суспензии спор

American Biological Control Co. American Sterilizer Co. BBL Microbiology Systems Castle Co. Div., Sybron Corp. Gibraltar Biological Laboratories, Inc. North American Science Associates, Inc.

American Sterilizer Co. Castle Co. Div., Sybron Corp. North American Science Associates, Inc. Propper Manufacturing Co., Inc.

American Sterilizer Co. 3M Co.

BBL Microbiology Systems EM Laboratories, Inc.

American Sterilizer Co. Castle Co. Div., Sybron Corp. North American Science Associates, Inc.

есть функция числа параллельных проб. Чтобы была уверенность в надежности результатов стерилизации, перед экспериментом следует тщательно проверить оборудование. По вопросам стерилизации см. обзор [25].

Перед стерилизацией необходимо определить также число и типы микроорганизмов, находящихся в объекте (микробное загрязнение). Время, требуемое для стерилизации, получают умножением параметра D для имеющегося в материале микробного загрязнения на общее число бактерий в стерилизуемом объеме. Если определено время, необходимое для инактивации загрязняющих микроорганизмов, можно вычислить вероятность отсутствия стерильности в отношении наиболее устойчивого микроба.

Биологические индикаторы (БИ) содержат известные концентрации микроорганизмов, обычно бактериальных спор, которые при определенном воздействии гибнут с прогнозируемой скоростью. БИ могут быть приготовлены на различных носителях (например, на фильтровальной бумаге, нитях или кусочках глины), иногда их непосредственно вносят на поверхность или внутрь стерилизуемого материала. В табл. 23.1 указаны виды бактерий, споры которых чаще всего используются для наблюдения за процессами стерилизации. В табл. 23.2 приведены поставщики БИ.

Вероятность отсутствия стерильности для микроорганизма из числа БИ может быть вычислена так же, как и для микробного загрязнения. Для определения фактора безопасности должно быть известно, как соотносятся между собой вероятности нестерильности БИ и исследуемого загрязнения. Часто вместо параметра D для микробиологического загрязнения в уравнение вероятности подставляют параметр D для БИ. Это позволяет в самых плохих условиях найти время, необходимое для стерилизации.

Системный подход к производству стерильных продуктов включает в себя следующие условия:

1. Приготовление, отбор и распределение материала таким образом, чтобы число микробов в нем было сведено к минимуму.

2. Использование того процесса стерилизации, кото» рый соответствует образцу и его упаковке.

3. Выбор такой упатаэвки, которая не препятствовала бы процессу стерилизации и способствовала бы поддержанию стерильности после его окончания.

4. Измерение параметров процесса стерилизации для контроля правильности его проведения.

5. Хранение образцов после стерилизации в соответствующих условиях.

6. Доставка, открывание контейнеров и использование материала без загрязнений.

В табл. 23 3 представлены известные методы стерилизации и материалы, обычно стерилизуемые этими методами. Ниже перечислены факторы, вызывающие гибель микроорганизмов^ которые следует учитывать при выборе процесса стерилизации.

1. Конструкция и (или) химический состав образца.

2. Биологическое и физическое состояние микроорганизма перед стерилизацией.

3. Наследственная устойчивость микроорганизма к стерилизации и получаемая в итоге скорость его гибели.

4. Исходное количество микроорганизмов в образце, подлежащем стерилизации.

5. Сила стерилизующего агента.

G. Продолжительность пребывания в условиях стерилизации.

23.1. СТЕРИЛИЗАЦИЯ ПАРОМ

Стерилизацию паром (влажным жаром) проводят в автоклаве с насыщенным паром под давлением обычно в течение 15 мин при температуре 121 °С. Могут быть использованы и другие соотношения между временем и температурой. Вопрос об эквивалентной летальности подробно рассмотрен в работах [2,9—11, 14, 34, 36].

Большинство автоклавов относится к гравитационным: пар движется в них сверху вниз под действием разности плотностей воздуха и пара (рис. 23.2). В таких автоклавах существенны проблемы проникновения влаги, перегрева, удаления воздуха, а также отрицательные последствия, вызываемые воздействием тепла и (или) влаги. Весьма важны правильное приготовление стерилизуемых образцов и надлежащая загрузка. Изготовители автоклава дают указания по установке термопар в стерилизуемом материале, для того чтобы определить оптимальный режим загрузки автоклава.

Наиболее удобны для использования в лабораториях автоматические автоклавы, оснащенные датчиками времени и автоматическими регуляторами температуры. Применяются и некоторые другие системы автоклавирования влажным жаром, в которых для удаления пузырьков воздуха используют высокий вакуум, попеременную подачу пара и вакуума, каскад горячей воды или ванночки для погружения в нее (Vacudyne-Altair, American Sterilizer Co., FMC, и Rexham Co.).

Присутствие воздуха приводит к тому, что камера нагревается медленнее и до более низкой температуры. В табл. 23.4 представлены значения температур для не

скольких смесей воздуха с паром в сравнении с температурами для чистого пара. Лабораторные автоклавы должны иметь датчики режима работы на шкалах термометра (установка температуры зависит от давления насыщенного пара) и манометра.

Важно знать, какое влияние на проникновение пара оказывают загружаемые образцы, вязкость растворов, размеры емкостей, а также плотность загрузки. Кроме того, на гибель микробов может влиять химический состав раствора, используемого для получения пара [18]. В каждой отдельной загрузке материалов следует выяв* лять и учитывать области, в которых возможно понижение температуры. Упаковки должны располагаться свободно по отношению друг к другу, чтобы не препятствовать проникновению пара. Предметы должны быть распределены так, чтобы обеспечить перемещение вниз более тяжелого воздуха.

В табл, 23.5 -показано, как в зависимости от объема жидкости и числа емкостей в загрузке меняется время, требуемое для стерилизации. Это время меньше для малых объемов. Таким образом, можно подобрать времена циклов стерилизации по размерам и числу емкостей.

Когда стерилизуемые растворы находятся в стеклянных сосудах, требуется соблюдать предосторожности. Чтобы по окончании цикла стерилизации эти емкости не разбились, необходимо контролировать время охлаждения, а также медленно понижать давление. В некоторых стерилизаторах для предотвращения повреждения стекла используют системы регулируемого охлаждения водой. Перед открыванием автоклава необходимо убедиться, что в нем установилось давление окружающей среды. Для большинства современных автоклавов такой проблемы нет, так как необходимый контроль осуществляется в них автоматически. При стерилизации колб и бутылей нужно неплотно закрывать пробки, чтобы обеспечить вентиляцию и предотвратить разбивание стекла. В промышленных масштабах в таких случаях часто используют системы повышенного воздушного давления. Когда емкости вынимают из автоклава, в них может понизиться давление, что вызывает заброс воздуха внутрь и приводит к загрязнению раствора, если только не используют плотные крышки или не принимают других предупредительных мер.

23.2. СТЕРИЛИЗАЦИЯ СУХИМ ЖАРОМ

Материалы, которые нельзя стерилизовать паром, часто стерилизуют сухим жаром (например, жиры, смазки, минеральное масло, воски и порошки). Для стерилизации сухим жаром используют горячий нагнетаемый в камеру воздух и инфракрасное излучение. Существует много^ выпускаемых промышленностью газовых

и электрических стерилизаторов сухим жаром, включая печи периодического действия и трубы накаливания непрерывного действия.

Сухой жар менее эффективен, чем пар, поэтому при его использовании требуются более длительные экспозиции при более высоких температурах. В табл. 23.6

представлены примеры соотношений между временем и температурой в случае стерилизации сухим жаром. Принципиальные преимущества сухого жара заключаются в том, что при его применении не происходит коррозии металлов и инструментов, не повреждаются стеклянные поверхности; он пригоден для стерилизации порошков и не содержащих воды нелетучих вязких веществ. К недостаткам данного метода относятся медленная передача тепла и продолжительные периоды стерилизации. При использовании сухого жара более высокие температуры могут неблагоприятно действовать на некоторые материалы. Кроме того, если нет циркуляции воздуха [7], может происходить образование слоев воздуха с разными температурами.

При обработке сухим жаром микроорганизмы погибают в результате окисления внутриклеточных компонентов. Споры бактерий более устойчивы к сухому жару, чем вегетативные клетки. Известны примеры типичных значений параметра D для спор при обработке сухим жаром [10].

23.3. ГАЗЫ

Газы для стерилизации применяются в тех случаях, когда медицинские материалы и оборудование нельзя стерилизовать другими способами. Процесс стерилизации газом более сложно контролировать, чем другие способы стерилизации, поскольку он характеризуется множеством параметров. При выборе конкретного споь соба стерилизации газом необходимо учитывать такие факторы, как существование различных газовых слоев, температурных зон, присутствие влаги, химических барьеров, механических препятствий диффузии (например, упаковка материалов), конденсация и полимеризация [4, 16, 17].

23.3.1. Окись этилена

Хотя показано, что бактерицидными свойствами обладают многие газы (формальдегид, окись пропилена, р-пропиолактон, озон, надуксусная кислота и метилбро-мид), для стерилизации медицинских приборов наиболее широко используется окись этилена (ОЭ) благодаря ее хорошей совместимости с различными материалами

страница 29
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45

Скачать книгу "Методы общей бактериологии. Том 3" (2.64Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]

п»ї
Rambler's Top100 Химический каталог

Copyright © 2009
(13.11.2019)