ь перчатки и защитную одежду.

24.3.2. Боксы класса II

В боксах класса II (рис. 24.4) используются ламинарные потоки воздуха, в них имеются передние окна для доступа к рабочему пространству и для внесения и удаления необходимых предметов. Предотвращение распространения инфекционного материала из воздушного пространства бокса достигается завесой воздуха, образуемой из неотфильтрованного воздуха, поступающего из комнаты в бокс, а также из воздуха, идущего через верхнюю решетку и проходящего через ВЭВ-фильтр. Эта завеса предохраняет также от поступления загрязнений из комнатного воздуха в рабочее пространство бокса. Воздух затягивается через решетку у переднего края рабочей поверхности в находящийся внизу приточный вентилятор, проходит через ВЭВ-фильтр, подается к верхней решетке и через нее поступает в бокс. Часть воздуха используется для поддержания воздушной завесы, а оставшаяся часть проходит вниз и вытягивается через решетку, расположенную у заднего края рабочей поверхности. Отфильтрованный воздух, поступающий через верхнюю решетку, опускается вниз однородным потоком, что сводит к минимуму возникновение завихрений. Этот воздух обеспечивает и поддерживает чистую атмосферу рабочего пространства. Часть воздуха, вытягиваемого через переднюю и заднюю решетки рабочей поверхности, которая равна притоку комнатного воздуха в бокс, также фильтруется и удаляется из бокса.

Существуют два типа боксов класса II: А и Б. Боксы типа А имеют фиксированное переднее окно. Скорость потока поступающего через окно воздуха составляет по крайней мере 22 м/мин. Рециркуляция воздуха в боксе велика, она составляет около 70%. Бокс может работать в режиме рециркуляции, возвращая отфильтрованный воздух в комнату. Если нет необходимости удалять накапливающиеся тепло и запахи из использованного воз1ЛЛАМАЛАУ1

духа, такой режим очень удобен, так как при этом сводятся к минимуму требования, предъявляемые к системам, поставляющим и вытягивающим воздух.

В боксах типа Б рециркуляция отработанного воздуха отсутствует. Они имеют вертикальные перемещаемые рамы, а не фиксированное окно, как в боксах типа А. При зазоре рамы 20 см скорость поступающего воздуха достигает 30,5 м/мин. Рециркуляция в этом боксе низка (около 30%). Боксы типов А и Б обеспечивают частичную защиту персонала, окружающей среды и экспериментальных материалов от заражения. В боксах типа Б можно работать с разбавленными препаратами химических канцерогенов, слабо радиоактивными материалами и летучими растворителями, когда поддерживается скорость поступающего воздуха 30 м/мин. Однако при работе с этими веществами необходимо точно знать их концентрации, которые не должны достигать опасного уровня. В противном случае возникают проблемы, связанные с устранением загрязнений. Боксы типа А нельзя использовать для работы с высокотоксичными, взрывчатыми, воспламеняющимися или высокорадиоактивными веществами, поскольку для них характерна интенсивная рециркуляция воздуха.

24.3.3. Боксы класса III

Боксы класса III (рис. 24.5) представляют собой полностью закрытую вентилирующуюся герметичную» камеру. Манипуляции в них производятся с помощью прикрепленных к передней панели резиновых перчаток.. Во время работы бокс находится под отрицательными воздушным давлением по крайней мере 1,3 см водяного столба. Воздух поступает в бокс через ВЭВ-фильтры. Удаляемый воздух проходит через два ВЭВ-фильтра,. установленные последовательно. Боксы класса III имеют отдельные вытягивающие вентиляторы.

Материалы вносят и удаляют через стерилизаторы! с двойными дверями и ванночки с раствором дезинфицирующего вещества. В качестве дезинфицирующих веществ можно использовать обычно применяемые средства, но только не газ. Модульные конструкции обеспечивают подсоединение к боксу холодильника, инкубатора, морозильника, центрифуги, камеры с животными,, а также других специальных приспособлений.

Бокс класса III обеспечивает самый высокий уровень защиты персонала и окружающей среды. Однако* защита может быть нарушена в случае прокола перчаток или в ситуациях, когда возникает положительное давление. В этом боксе нельзя работать с огнеопасными растворителями, если не показано, что их концентрации не достигают опасных пределов. Только в этом случае их можно вносить в бокс в закрытых небьющихся емкостях, но нельзя хранить там. Для работы в боксе класса III предпочтительнее электрические нагреватели.

24.4. ХИМИЧЕСКАЯ ДЕЗИНФЕКЦИЯ

Дезинфекция представляет собой удаление или разрушение патогенных микроорганизмов с неживых объектов или поверхностей обычно с помощью химического-агента. Она проводится с целью обеспечить надежность результатов биологических исследований или предотвратить возникновение и распространение заболеваний. Во многих случаях химическая дезинфекция необходима, поскольку не всегда удается применить наиболее надежный метод — стерилизацию паром, а также другие физические методы, например, когда имеют дело с большими пространствами, большими поверхностями и стационарным оборудованием. Кроме того, высокие температуры и влага часто портят точные приборы, особенно* имеющие сложные оптические и электронные части.

24.4.1. Типы веществ

Существует множество дезинфицирующих веществ, имеющих помимо химических фирменные названия. Дезинфицирующие вещества классифицируют по группам: кислоты или щелочи, галогены, тяжелые металлы, четвертичные аммониевые основания, фенольные соединения, альдегиды, кетоны, спирты, амины и перекиси. К сожалению, чем активнее дезинфицирующее вещество, тем более вероятно, что оно обладает нежелательными свойствами, такими, как токсичность или способность вызывать коррозию. Не существует дезинфицирующего средства, которое было бы одинаково применимо и эффективно при любых условиях. Устойчивость микроорганизмов к действию дезинфицирующих веществ может существенно меняться в зависимости от таких факторов, как концентрация активного компонента данного вещества, длительность контакта, рН, температура, влажность и присутствие органического вещества.

Этиловый или изопропиловый спирт часто употребляют для дезинфекции поверхностей в концентрации от 50 до 70%. Однако эти вещества обладают медленным обеззараживающим действием (несколько минут) и не эффективны против спор.

Формальдегид для использования в качестве дезинфицирующего агента обычно выпускается как 37%-ный водный раствор газа (формалин) или как твердое по-лимеризованное соединение (параформальдегид). Формальдегид в 5%-ной концентрации является эффективным жидким дезинфектантом и применяется для стерилизации комнат или зданий. Однако формальдегид в значительной степени теряет дезинфицирующую активность при низких температурах, близких к 0°С, а его острый, раздражающий запах требует соблюдения предосторожностей при использовании растворов формальдегида в лаборатории.

Фенол сам по себе не часто используется как дезинфицирующее вещество. Он обладает неприятным запахом, а на обработанных поверхностях оставляет клейкий осадок. Однако фенольные соединения служат основой для ряда распространенных дезинфицирующих средств, которые эффективны против вегетативных клеток бактерий в больших разведениях и практически лишены запаха (например, о-фенилфенол). Однако фенольные соединения неэффективны против бактериальных спор.

Четвертичные аммониевые основания характеризуются сильными поверхностно-активными свойствами, что* делает их хорошими очистителями поверхности. Они связываются белками, поэтому в присутствии последних разбавленные растворы четвертичных аммониевых оснований теряют эффективность. При их добавлении в суспензию бактерии имеют тенденцию слипаться в комки, которые разрушаются под действием анионных детергентов, таких, как мыло. В средних концентрациях они бактерицидны, но против туберкулезной палочки и спор не эффективны даже при высоких концентрациях. К достоинствам четвертичных аммониевых оснований относятся следующие: они не имеют запаха, не оставляют пятен, не вызывают коррозии металлов, устойчивы, недороги и относительно нетоксичны.

Хлор представляет собой универсальное дезинфицирующее вещество, активное против всех бактерий, включая бактериальные споры, и эффективное в широком диапазоне температур. Хлор легко соединяется с белком, так что в присутствии белков его следует брать в избытке. Свободный доступный хлор является активным элементом. Он представляет собой сильный окислитель-и вызывает коррозию металлов. Растворы хлора постепенно теряют силу, поэтому перед использованием их следует готовить заново. В качестве основы хлорных дезинфицирующих средств используется гипохлорит натрия. Отличное дезинфицирующее вещество можно приготовить из отбеливателей, применяемых в домашних условиях и в прачечных и содержащих 5,25% или 52 500 ч. на млн. хлора, доступного для высвобождения. Если сделать разведение 1 : 100, то раствор будет содержать 525 ч. на млн. доступного хлора, а после добавления 0,7% неионного детергента получают очень хорошее дезинфицирующее вещество.

Иодофоры представляют наиболее распространенную группу дезинфицирующих средств, используемых в лабораторных условиях, а один из них — вескодин (Wes-codyn) применяется, пожалуй, наиболее широко. Диапазоны разбавления вескодина, рекомендуемые фирмойизготовителем (West Chemical Products Inc., New York, KY 11101), составляют от 1 унции на 5 галлонов воды (что дает 25 ч. на млн. доступного иода) до 3 унций на 5 галлонов воды (что дает 75 ч. на млн.). Такое небольшое количество вескодина связывается в присутствии постороннего белка, поэтому 0,0075%-ным раствором этого вещества можно эффективно обработать чистую поверхность или чистую воду, но в присутствии сколько-нибудь значительного количества белка такая обработка не дает желаемых результатов. Для мытья рук и обработки спор вескодин рекомендуется разбавлять в соотношении 1 : 10 в 50%-ном этаноле, что дает 1600 ч. на млн. доступного иода. При такой концентрации инактивация большинства бактерий происходит относительно быстро. В качестве дезинфицирующего средства эффективен спиртовой раствор (настойка) иода, правд