|
|
Транскрипция и трансляция. Методыдрофолатредуктаза (DHFR) 41 Диэтилпирокарбонат (ДЭПК) 217— 218, 255, 256 ДНК, введение радиоактивной метки 174—176 — вирусов эукариот, упаковка in vitro 32 — выделение из папилломавируса быка по методу Хирта 46 — высокомолекулярная хромосом- ная, выделение 16 — геномная, использование при трансформации 18 — микроинъекция в клетки млекопи- тающих методом «прокалывания» 28—29 -----с помощью микропипетки 26—28 ---ооциты Xenopus, анализ РНК-транскриптов, картирование З'-концов 84 --------5'-концов 79 -------- с помощью нуклеазы S1 79, 81—82 ------—---наращивания затравки 84 ---— — выделение РНК после инъекции 75—76 -----идентификация РНК-полимераз 84—85 ----- исследование регуляторных белков 87 ------сопряженной транскрипции—трансляции 86— 87 -----конформация, стабильность и концентрация инъецированной ДНК 69—70 Предметный указатель 385 -----метод центрифугирования 72—74 <— ·----мечение белков, кодируемых инъецированной ДНК 75 ------РНК-транскриптов 74—75 .—----определение сайтов инициации транскрипции 79—84 ¦-------терминации транскрипции 85 — ---- основное оборудование 68—69 ----- получение ооцитов 68 .-----посттранскрипционный процессинг 85 —----«слепой» метод 70— 73 -----сплайсинг РНК 68, 85 ¦— очистка имеющихся в продаже препаратов 18—19 — разделение цепей 174, 176 — рекомбинантная плазмидная, вы- деление 17—18, 46, 201, 223—224 — сверхспиральная 98, 244—245 — удаление из препаратов РНК 99 — фаговая, выделение 235 — электрофорез в полиакриламид- ном геле 176 ДНКаза, определение активности 116 — I, применение при выделении РНК 123 ДНК-Целлюлоза 165 ДЭАЭ-декстрановый метод трансфекции клеток млекопитающих 24— 26 Зьюби, выделение плазмидной ДНК 223—224 —---оборудование и реактивы 217—218 —---оптимальные концентрации ионов магния и БЗО-экстрак-та 224—229 ----получение БЗО-экстракта 221—223 Иммунопреципитация продуктов трансляции эукариотической мРНК в бесклеточных экстрактах 303, 305 --¦----ооцитах Xenopus 352—353 Кальцийфосфатная методика трансфекции клеток млекопитающих, абсорбция копреципитата ДНК— фосфат кальция 20 —----время предселективной экспрессии 20—21 -----ДНК-носитель 12г 18-19. -----донорная ДНК 16 ---— — котрансформация 23—24 -----кривые «доза — ответ» 21—22 ----- основная процедура 11—16 --—--отбор на метоцеле 15 ----- реципиентные клетки 19 ----- «усилители» экспрессии 22—23 Картирование З'-концов РНК-транскриптов с помощью нуклеазы S1 84. См. также Нуклеаза S1 -----РНКазы T1 144—147 — 5'-концов РНК-транскриптов ме- тодом наращивания затравки 84 ---. — «отпечатков пальцев» 99 ---с помощью нуклеазы S1 60—61, 79, 81—82, 174—179. См. также Нуклеаза S1 ----- прерванной транскрипции 94—99 _____РНКазы T1 144—147 — сайтов инициации транскрипции см. Картирование 5'-концов-РНК-тр анскриптов 25—953 386 Предметный указатель Колифаг MI3mp7 371 — id 371 Ксантин-гуанин—фосфорибозилтрансфераза (XGPRT) 40 ?-Лактамаза 29, 235—236 Липосомы как переносчики генов 29—31 Луриа агар 189 Матричная РНК (мРНК), выбор метода выделения 257 -- выделение из вирусов 268—270 ----полисом 262—268 --— — целых клеток или цитоплазматических фракций 257— 262 ----методом селективной гибридизации 274 ---ро1у(А)--мРНК 273—274 — — защита от загрязнения РНКазой 254, 255, 272—274 -- использование растворов LiCl и мочевины 262 ¦---кэпирование 84, 105, 131—136, 155—156 --- метод «смещения равновесия» 318 -- микроинъекция в ооциты Xenopus, биологические тесты для выявления синтезированных белков 331, 344 ------выбор радиоактивных предшественников для введения метки 346—348 ------двумерный гель-электрофорез 354—356 --- —---извлечение яичника из лягушки 334 ------иммунопреципи- тация 352—353 ------ ингибирование трансляции 358—359 ------ компартментация и секреция чужеродных белков 330 ------ культивирование ооцитов после инъекции 346 -----·--необходимое оборудование 336—340 ------ подбор концентрации РНК 343—344 ------ подготовка ооцитов к инъекции 334—336 ------ посттрансляционная модификация белков 329, 331, 358, 360 ------процедура введения метки 349 — —----сравнение с бес- клеточными системами 327—331 — — ---- стабильность инъецированных мРНК 343 ------ субклеточное фракционирование ооцитов 350— 352 ---—--трансляция инъецированных мРНК 327—329 --— —--электрофорез в ПААГ—ДСН без восстановления 353—354 ------·---в восстанавливающих условиях 353 -----— энуклеация ооцитов 356—358 --очистка poly (А)+-мРНК аффинной хроматографией на oligo(dT)-целлюлозе 271—272 —-----·--poly (U)-сефарозе 151—153, 272—273 --¦--гель-электрофорезом 270—271 --¦--связыванием с немоди- фицированной целлюлозой и фильтрами типа Millipore 273 --¦--фенольной экстракцией при нейтральном рН 273 ----¦ центрифугированием в градиенте плотности -сахарозы 270 --процессинг предшественников Предметный указатель 387 см. Процессинг посттранскрипционный -- трансляция см. Трансляция Мембранные везикулы из Е. coli, получение и использование 237, 239, 240 Мембраны мнкросомные, выделение из поджелудочной железы собаки 309—311 Метоцель, отбор трансформированных клеток 15—16 Модификации посттрансляционные в ооцитах Xenopus 329, 331, 358, 360. См. также Сигнальные последов ательности Нуклеаза микрококковая, обработка лизата ретикулоцитов 285—287 ---экстрактов зародышей пшеницы 293 ---- клеток асцитной опухоли Эрлиха 299 — S1, картирование З'-концов РНК- транскриптов 84 ---5'-концов РНК-транскриптов с использованием радиоактивной ДНК 59—60, 79—81, 174—180 --------РНК 99— 101 ¦---сайтов инициации транскрипции 173—180 — — количественное определение специфических РНК-транскриптов 99—101, 169—172 --удаление неспецифической РНК 99 Нуклеазы см. ДНКаза, РНКаза, Нуклеаза S1 Нуклеосомы 184 Нуклеотиды меркурированные, использование при выделении РНК-транскриптов 137—138, 166—169 2',5'-Олигоаденилаты как ингибиторы белкового синтеза 3, 19 Oligo(dT)-целлюлоза, очистка мРНК 271—272 Онкогены 43 Папилломавирус (BPV) 46—48 Паповавирус 33 Плазмида pACYC184 188 — pAG60 39 — ? AT 153, 223, 365 — pBPVl-Dl 45 — pBpV-Hl 45 — pBPV-rfe 45 — pBR322 101, 210, 226, 365 — pBR325 223, 234, 235, 245, 249 — pBS42 188 — pKN410 247 — pLG281 235 — pLG517 188 — pMX 176, 177 — pSClOl 200 — pSV2-cat 39 — pSV2-dhfr 39 — pSV2-gpi 39 — pTKl 12, 52—55 — рТКЮ 52 — pTKBVl-201 54 — рТКВХЭ 54 — pTKel 52 — ??????-? 59, 60 — pTKlMOEl 54 — pTKMOLTRl 52 — pTKlSVl 54 Поливинилсульфат как ингибитор РНКазы 274 Полисомы, выделение мРНК 268 — иммунопреципитация 266—267 — получение методом высокоско- ростного центрифугирования 262—263 --осаждением солями магния 264 — связанные и свободные, разделе- ние 265—266 — фракционирование по размерам 266 — центрифугирование в градиенте 25* 388 Предметный указатель плотности сахарозы 262—267, 319 Предшественники белков см. Модификации посттрансляционные, Сигнальные последовательности Протеаза, определение активности 117 — предохранение белков от ее воз- действия 115, 214 Протопласты, слияние для переноса генов 31 Процессинг посттранскрипционный предшественников мРНК, кэпи-рование 84, 105, 131—136, 155— 156 ----метилирование 105, 154—155 ---- полиаденилирование 105—108, 151—154 ----сплайсинг 85, 105, 156 ---рРНК 156 ---тРНК 156 Регуляторные белки в ооцитах Xenopus, определение 87 — факторы в ядрах, определение 157 Репрессор трансляции эукариотической мРНК в лизате ретикулоцитов 280, 286, 318 Рибонуклеозидтрифосфаты меркури-рованные, использование для выделения РНК-транскриптов 168 РНК, выделение из клеток млекопитающих 36. См. также Матричная РНК (мРНК) --- ооцитов Xenopus после инъекции 75—76 ---экстракта клеток HeLa 93— 94 --- ядер 123 — выход из ядер 156—157 — изучение структуры 5'-конца ме- тодом «отпечатков пальцев» 99 — количественное определение. 37, 121, 123, 138—142, 171—173 — метилирование 105, 154—155 — определение размеров 79, 80—81, 95—96, 101, 124—125, 142—144, 270 — полиаденилирование 151—154 — полиаденилированная, выделение 151—153, 271—274. См. также Матричная РНК (мРНК) --определение длины poly (А) - последовательностей 152—154 —· процессинг см. Процессинг посттранскрипционный —¦ фракционирование с помощью гель-электрофореза 100, 125, 270—271 --— —· центрифугирования в градиенте плотности сахарозы 124, 270—271 — электрофорез в ПААГ 125, 270 РНКаза, защита от ее действия 115—117, 217—218, 255—257, 260, 262, 274—275 — определение активности 116 — Т1, картирование концов РНК-транскриптов 144—147 --расщепление РНК 126, 142— 146 РНК-зависимая транскрипция 180 РНК-полимераза Е. coli, выделение 162—164 -- транскрипция хроматина см. Хроматин РНК-транскрипты, анализ с помощью гель-электрофореза 77 — количественная оценка с по- мощью дот-гибридизации 138— 142 Ртуть-агароза, использование при выделении РНК-транскриптов 128—129 — получение 129—-130 Ртуть-целлюлоза, использование при выделении РНК-транскриптов 128—130 — получение 130 Предметный указатель 389 Сайты рестрикции, идентификации с помощью систем транскрипции-трансляции in vitro 249 Сверхспирализация, стимуляция транскрипции 244—245 Сефароза с ковалентно пришитым белком А, использование при иммунопреципитации продуктов трансляции 305, 306 — тиолированная, использование для выделения РНК-транскриптов 166—169 Сигнальные последовательности, выделение микросомных мембран 309 — — изучение с помощью мембран- ных везикул 237, 239—240 --отщепление при переносе белков через мембраны 311—313 -- сравнение продуктов белкового синтеза in vivo и in vitro 237— 240 — — узнавание с помощью специ- фического белка 312 Синтез бе |
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 |
Скачать книгу "Транскрипция и трансляция. Методы" (6.57Mb) |
[каталог] [статьи] [доска объявлений] [обратная связь] |