ина (Clark, Klebanoff, 1979а, 1980), что можно рассматривать в качестве провоспалительного эффекта.

Миелопероксидазная система может ослаблять функциональную активность естественных киллеров (NK-клеток) (El-Hag, Clark, 1987) в культуре клеток. Это воздействие обратимо, поскольку через 24 ч после начала экспозиции с МПО-системой функциональная активность лимфоцитов восстанавливается. Все три основных типа лимфоцитов (В- и Т-лимфоциты, NK-клетки) подвержены ингибиторному воздействию со стороны миелопероксидазной системы. Наиболее чувствительны к ней антителопродуцирующие В-лимфоциты, а естественные киллеры и Т-лимфоциты — в меньшей степени.

Миелопероксидаза как модификатор структуры медиаторов и ферментов может вовлекаться в разнообразные стороны протекания воспалительных процессов. В частности, миелопероксидазная система может инактивировать один из ведущих ингибиторов сериновых протеиназ — а-1-ингибитор протеиназ (а-1-антитрипсин), окисляя его метионилы»ые остатки (Matheson et al., 1979; Matheson, Travis, 1985). Непосредственно инактивирующим a-1-ингибитор агентом является гипохлорная кислота — один из основных продуктов МПО-системы. Инактивация a-1-ингибитора протеиназ может приводить к нарушению баланса сериновые протеиназы — ингибиторы в очагах воспаления.

МПО может усиливать протеолитический потенциал очагов воспаления путем активации коллагеназы (Weiss et al., 1985) и желатин азы (Peppin, Weiss, 1986) нейтрофилов. Коллагеназа — металлоэнзим, сохраняющийся в латентной форме в гранулах нейтрофилов. После активации и секреции из клеток она избирательно расщепляет межклеточный коллаген.

Окисляя е-аминогруппы лизиновых остатков эластина (Clark et al., 1986) и других белков (Stahmann et al., 1977) миелопероксидазная система инициирует сшивание белковых молекул, которое может приводить к образованию нерастворимых полимеров, откладывающихся в воспаленной соединительной ткани. Так же, по-видимому, могут формироваться в очагах воспаления и агрегаты иммуноглобулинов IgG (Stahmann, Spencer, 1977).

Наряду с провоспалительными эффектами некоторые функциональные проявления МПО-системы могут рассматриваться как направленные на снижение интенсивности воспалительного процесса. В частности, МПО-система путем окисления инактивирует такие медиаторы воспаления, как лейкотриены В4 (Henderson et al., 1982) и С4 (Lee et al., 1983). Она в состоянии инактивировать также растворимые хемотакси-ческие пептиды — С5а и формилметиониловые пептиды (Clark, Klebanoff, 1979; Clark, Szot, 1982). Молекулярный механизм инактивации этих пептидов связан с окислением тиоэфирной группы метионина (Clark et al., 1980), которое приводит к снижению агрфишштета хемо-таксинов к мембранным рецепторам. Возможно, что благодаря такому процессу происходит снижение потока миграции нейтрофилов в ткани в конце первой фазы острой воспалительной реакции.

Важным фактором регуляции фагоцитарного и воспалительного процессов является, по-видимому, способность МПО-системы инактивировать белковые токсины микроорганизмов. В модельной системе in vitro была продемонстрирована ее способность инактивировать дифтерийный и столбнячный токсины (Agner, 1950, 1958), гемолитический токсин из Streptococcus pneumoniae (Clark, 1986), а также токсин цитоплазмы Clostridium difficile (Ooi et al., 1984).

Таким образом, функциональные проявления миелопероксидазной системы при фагоцитозе и воспалении могут быть многообразными, а часто и разнонаправленными. И если ее роль как антимикробной системы доказана однозначно (Klebanoff, 1992), то биологическая значимость ряда других ее активностей требует дополнительных обоснований.

К цитотоксическому действию МПО-системы чувствительны не только микробы, но и клетки макроорганизма. Она лизирует, в частности, эритроциты (Klebanoff, Clark, 1975), сперматозоиды (Klebanoff, Smith, 1970) и опухолевые клетки (Clark et al., 1975) в модельных системах in vitro.

Воздействие МПО-системы на опухолевые клетки представляет интерес в связи с поиском эффективных терапевтических средств в онкологии (Klebanoff, 1970). Одно из первых успешных применений миелопероксидазы было осуществлено при совместном введении фермента и алкилирующего соединения (тиотепа) крысам с аденокар-циномой молочной железы (Schultz et al., 1976). ГЛАВА 5 СЕРПРОЦИДИНЫ

5.1. КАТЕПСИН G

Компонентами гранулярной антимикробной системы нейтрофилов и моноцитов/макрофагов являются серииовые протеииазы с оптимальной ферментной активностью в нейтрально-щелочной области значений рН (Bainton et al., 1971; Spitznagel et al., 1974; Olsson, 1977; Ha-vemann, Gramse, 1984; Baggiolini, Dewald, 1985).

Протеиназа с субстратной специфичностью, подобной химотрип-сину, была выделена из нейтрофилов человека (Olsson, 1977; Olsson et al., 1978a, 1978b) и ряда животных (Starkey, Barrett, 1976; Barrett, 1981a). В настоящее время установлено, что в нейтрофилах человека содержится группа химотрипсиноподобных протеиназ, состоящих из 3—4 изозимов, которые характеризуются положительным зарядом своих молекул (pl~ 11.0), практически идентичными аминокислотными составами и иммунохимическими свойствами (Olsson, 1977). Расшифрована полностью первичная структура катепсина G человека (рис. 24) (Salvesen et al., 1987).

Из особенностей аминокислотного состава белка следует обратить внимание на высокую долю в нем аргинина (13—14 мол%) и дикарбо-новых аминокислот (19—20 мол%), свободные карбоксильные группы которых в значительной степени амидированы. Подобный состав аминокислот определяет катионный характер белковых молекул. Молекулярные массы выделенных белков, по данным электрофореза в присутствии додецилсульфата натрия, находятся в пределах 25 ООО—29 500 Да. Для всех белковых изоформ характерна химотрип-синоподобная ферментативная активность в отношении искусственных субстратов (например, этилового эфира бензоилтирозина) с оптимумом рН в диапазоне 7.0—7.5.

Избирательное подавление энзиматической активности рассматриваемых протеиназ а 2-макроглобулином, а1