s in athymic nude mice, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78, 1171 (1981).

50. Kawase I., Urdal D.L., Brooks C.G., Henney C.S. Selective depletion of NK cell activity in vitro and its effect on the growth of NK sensitive and NK resistant tumor cell variants, Int. J. Can., 29, 567 (1982).

51. Talmadge J.E., Myers K.M., Prieur D.J., Starkey J.R. Role of NK cells in tumor growth and metastasis in beige mice, Nature, 284, 622 (1980).

52. Bernstein I., Tamm M., Nowinski R.C. Mouse leukemia: Therapy with monoclonal antibodies against a thymus differentiation antigen, Science, 207, 68 (1980).

53. Tap K.L., Ada G.L., McKenzie I.C.F. Transfer of specific cytotoxic T lymphocytes protects mice inoculated with influenza virus, Nature, 273, 238 (1978).

54. Loveland B.E., McKenzie I.F.C. Cells mediating graft rejection in the mouse, Transplantation, 33, 407 (1982).

55. Cole G.A., Gilden D.H., Monjan A.A., Nathanson N. Lymphocytic choriomeningitis: Pathogenesis of acute central nervous system disease, Fed. Proc, 30, 1831 (1971).

56. Kaufmann Y., Berke G., Eshar Z. Cytotoxic T lymphocyte hybridomas which mediate specific tumor cell lysis in vitro, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78, 2502 (1981).

Глава 26

Реакция гиперчувствительности замедленного типа

Марк И. Грин, Сэм Шаттен, Джонатан С. Бромберг

(Mark I. Greene, Sam Schatten, Jonathan S. Bromberg)

Гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ) — это зависимая от Т-клеток иммунологическая реакция, проявляющаяся в виде воспаления в месте попадания в организм антигена — обычно в коже. Максимальная интенсивность реакции достигается через 24—48 ч после инициации. По этому признаку ее можно отличить от гиперчувствительности немедленного типа или реакции Ар-тюса (Arthus), которая определяется наличием антител и достигает максимума через минуты и часы. Феномен ГЗТ был впервые описан в начале нашего столетия Кохом (Koch) обнаружившим, что кожа больных туберкулезом людей и животных чувствительна к туберкулину — продукту микобактерий. Эта реакция считается теперь классической ГЗТ [1]. Хотя такая зависящая от Т-клеток реакция наблюдается in vivo, было разработано несколько тестов in vitro, которые, как считается, коррелируют с ГЗТ. К ним относятся реакции пролиферации Т-клеток и определение количества лимфокинов, например фактора, инги-бирующего миграцию (ФИМ, MIF). Исследование реакций ГЗТ in vivo пролило свет на специфическую функцию Т-клеток в организме интактного животного и обогатило наши значения о зависимых от Т-клеток иммунных реакциях и механизмах их регуляции.

26.1. Варианты замедленной гиперчувствительности и клетки, участвующие в этой реакции

На ранних этапах изучения иммунологических процессов Мечников пришел к выводу, что за приобретенный антимикробный иммунитет отвечают определенные клетки, которые он называл „активными лейкоцитами" [2]. Неопровержимые данные о том, что за гиперчувствительность замедленного типа отвечают лимфоциты, впервые получили Ландштейнер и Чейз [3]. Иммунитет замедленного типа, развивающийся в ответ на контакт с сенсибилизирующим антигеном, оказалось возможным перенести неиммунизированным морским свинкам с помощью живых интактных клеток, полученных от иммунных доноров, но не с помощью иммунной сыворотки от тех же животных. Впоследствии Чейз установил, что ГЗТ к туберкулину можно таким же образом переносить с помощью иммунных лимфоцитов. Лимфоциты, способные переносить ГЗТ, являются Т-клетками и называются Тгзт-лимфоцитами. С помощью иммунных лимфоцитов можно перенести также ГЗТ к растворенным белковым антигенам.

Одна из форм ГЗТ — контактная чувствительность (КЧ, CS), наблюдается при нанесении на кожу животных высокореактивных химических соединений,

26. Реакция гиперчувствительности замедленного типа таких, как тринитрохлорбензол (ТНХБ) или динитрофторбензол (ДНФБ) [4]. Эти вещества ковалентно связываются с белками кожи и образуют неоантигены. Через 4—7 дней контакт с антигеном повторяют, нанося его накожу или на поверхность одной из ушных раковин; через 24—48 ч после повторного нанесения возникает воспалительная реакция. Классический иммунитет типа ГЗТ вызывают и поддерживают с помощью внутрикожного или подкожного введения антигена. Следует отметить, что в ответ на некоторые антигены ГЗТ возникает и при их внутривенном или внутрибрюшинном введении [5].

В работах ряда авторов сообщалось, что некоторые формы похожих на ГЗТ реакций удается переносить у человека и мышей с помощью клеточных экстрактов. В этом переносе принимает участие диализуемый из экстракта лейкоцитов фактор переноса с мол. массой 10 ООО Да [6]. К этим работам следует относиться с осторожностью, поскольку не удается получить достоверно воспроизводимые данные о специальной роли такого диализуемого фактора в иммунитете [7]. Возможно, этому помогут усовершенствованные биохимические методы, но пока что о факторе, переносящем ГЗТ, можно лишь с осторожностью говорить, что это недостаточно точно идентифицированное вещество, участвующее в иммунных реакциях. Таким образом, возможность перенесения реакции ГЗТ специальными лимфоидными клетками сомнению не подлежит, но перенос ее с помощью субклеточных структур пока не удается воспроизвести достоверно.

Кожная базофильная гиперчувствительность (КБГ, СВН) или реакция Джонса-Мота [Jones-Mote] представляет собой еще один вариант иммунной воспалительной реакции замедленного типа; она переносится В-клетками, антителами сыворотки и, возможно, Т-клетками [8]. В некоторых отношениях эта реакция отличается от классической ГЗТ. Классическая реакция ГЗТ, как и КЧ переносится только клетками, тогда как реакция КБГ может переноситься также и сывороткой. Все типы замедленных реакций (ГЗТ, КЧ, КБГ) запускаются через 16—48 ч после инициации. При классической ГЗТ и КЧ возникают инфильтраты с преобладанием мононуклеаров и наблюдается отчетливое уплотнение ткани; базофилы, как правило, отсутствуют. При КБГ уплотнения не происходит, однако возникают эритематозные повреждения, а среди клеток инфильтрата значительная доля приходится на базофилы. Кроме того, КБГ встречается не у всех видов животных. Эта быстро преходящая реакция наблюдается у людей после введения белковых антигенов в физиологическом растворе, а также у морских свинок, иммунизированных антигеном в неполном адъю-ванте Фрейнда; у мышей, однако, такие реакции не возникают. Как подчеркивается ниже, в возникновении классической реакции ГЗТ и КЧ определяющую роль играют генетические ограничения, накладываемые главным комплексом гистосовместимости (МНС); в случае КБГ таких ограничений не обнаружено.

Реакция ГЗТ имеет ряд особенностей, отличающих ее от других реакций. Если для иммунизации использовать антиген в полном адъюванте Фрейнда, то способность иммунных животных поддерживать реакции, определяемые Тгзт-клетками, сохраняется длительное время (несколько недель и даже месяцев). В отличие от этого при подкожном введении антигена, ковалентно связанного с клеточной поверхностью, или при нанесении антигена на кожу максимальный иммунитет возникает у мышей уже через 5—7 дней после иммунизации. Если реакции ГЗТ и КЧ индуцировать в период максимальной реактивности животного, воспалительная реакция достигнет максимума через 24—48 ч.

На рис. 26.1 показана гистологическая картина реакции контактной чувствительности через 24 ч. Мышей сенсибилизировали, нанося на кожу живота раствор ТНХБ, а через 5 дней индуцировали реакцию, нанося тот же раствор М. И. Грин, С. Шаттен, Д. С. Бромберг

на ухо. Отек и уплотнение ткани появляются через 24 ч, не исчезают в течение 48 ч, а затем спадают. Обработка таких иммунных к ТНХБ мышей другим сенсибилизирующим агентом не приводит к отеку уха; следовательно, реакция специфична по отношению к данному антигену. Другой особенностью ГЗТ является бластогенная реакция клеток в паракортикальной Т-клеточной области лимфатических узлов, дренирующих участок нанесения антигена. Через некоторое время в других участках этих узлов (В-клеточных) также возникают пролиферативные изменения [5].

Осуществляющие ГЗТ иммунные лимфоциты захватывают антиген, по-видимому, в непосредственной близости от места его введения. Специфическое

Рис. 26.1. А. Гистологическая картина участка поражения при контактной чувствительности. Мышам линии BALB/c наносили на часть живота (после удаления волосяного покрова) раствор тринитрохлорбен-зола (ТНХБ). Через 5 дней тот же раствор

наносили на одно ухо. Через 24 ч после этого начинался отек ушей. После этого брали образец пораженного участка уха для гистологического исследования. Б. Контроль, ТНХ Бнаносили на ухо без предварительной иммунизации.

узнавание антигена приводит к активации этих клеток, и они начинают синтезировать большое количество антиген-специфических факторов, неспецифических факторов и лимфокинов. Некоторые лимфокины привлекают и активируют клетки других типов, находящиеся вблизи от места введения антигена. К последним относятся клетки ряда моноцитов-макрофагов, некоторые другие мононуклеарные клетки и нейтрофилы. У мышей встречаются довольно много полиморфноядерных лейкоцитов; у людей и морских свинок их, напротив, очень мало [5]. На рис. 26.1 хорошо видны мононуклеарные клетки (фотография получена через 24 ч после нанесения антигена). Необходимо заметить, что при этом

26. Реакция гиперчувствителъности замедленного типа наблюдается лишь очень слабый отек, поскольку при реакции ГЗТ проницаемость сосудов обычно не меняется. Это приводит к уплотнению ткани, а не к эритематозной реакции.

Хотя моноциты и макрофаги непосредственно участвуют в этой иммунологической реакции, они, по-видимому, не обладают иммунологической специфичностью. Накопившись в очаге воспаления и будучи активированными взаимодействиями с антигенами, специфическими иммунными лимфоцитами и лим-фокинами, они вызывают неспецифическое разрушение ткани и отек либо непосредственно, либо выделяя свои собственные монокины [1, 5]. Во многих повреждениях ГЗТ вокруг мелких сосудов наблюдаются мононуклеарны