ницаемости сосудов и сокращения гладких мышц.

Ацетилглицерильные эфиры ФХ могут образовываться как при иммунологической, так и при неиммунологической стимуляции. Неиммунологические факторы, индуцирующие образование АГЭФХ в нейтрофилах животных и человека, включают смесь ФМЛФ и цитохалазинов или опсонизированный зи-мозан [419]. Синтез ФАТ эффективно стимулируется в лейкозных базофилах человека, лейкоцитах и других клетках под действием ионофора А23187. В активированных нейтрофилах и базофилах кролика и в нейтрофилах человека практически вся активность АГЭФХ образуется de novo во время стимуляции клеток. В этих системах активность АГЭФХ выявляется уже через 15—30 с после стимуляции. Активность секретируется в среду через несколько минут, но даже в более поздние сроки ее количество в среде не превышает одной трети общего количества синтезированного АГЭФХ. В лейкоцитах и легких человека обнаружено значительное количество предсуществующего АГЭФХ. Не исключено, однако, что значительная часть этого АГЭФХ образуется при клеточном и тканевом процессинге и еще предстоит доказать однозначно, что ФАТ действительно существует еще до разрушения клеток.

Механизм биосинтеза АГЭФХ пока не установлен, хотя было показано, что эта молекула может образовываться ферментативно. В ряде лимфоидных и

27. Медиаторы: высвобождение и функции других тканей, в частности, был описан фермент ацетил-СоА : 1-алкил-2-лизо-SN-глицерол-З-фосфохолин-ацетилтраисфераза, переносящий ацетильную группу на эфирные аналоги лизофосфатидилхолина [424]. Более того, известно, что обычная фосфолипаза А2 способна использовать в качестве субстрата 1-алкил-2-ацилглицерил-ФХ и, таким образом, синтезировать предшественник лизо-ГЭФХ. Однако вопрос о том, участвуют ли эти ферменты в образовании ФАТ при активации клеток, ответа пока не имеет.

In vivo АГЭФХ быстро разрушается. Основной путь инактивации, по-видимому, включает деацетилирующие ферменты, присутствующие в липо-протеидной фракции плазмы человека и животных [419, 425]. Имеются предварительные данные в пользу того, что лизо-ГЭФХ обычно присутствует в крови. Эти данные показывают, что ГЭФХ может освобождаться в кровоток и деградировать даже в присутствии явной системной стимуляции [419]. Ферменты, деацетилирующие АГЭФХ, присутствуют также в цитозоле печени и селезенки [426]. Из этого следует, что инактивация может происходить не только в крови, но и в тканях. Другой возможный путь инактивации состоит в расщеплении эфирной или фосфатной связи.

Ацетилглицерильные эфиры ФХ индуцируют агрегацию тромбоцитов кролика и человека, которая обратима, за исключением тех случаев, когда они используется в высоких концентрациях [419]. Тромбоциты кролика агрегируют уже при концентрации ФАТ порядка Ю-11 М. Другие эффекты, вызываемые действием ФАТ на тромбоциты, включают в себя высвобождение ADP и другого содержимого гранул, ТкА2 (измеренного по содержанию ТкВ2), а возможно, и других метаболитов арахидоновой кислоты. При высоких концентрациях АГЭФХ агрегация, по-видимому, не требует предварительного высвобождения ADP или метаболитов арахидоновой кислоты, хотя при более низких концентрациях наблюдается двухфазная агрегация, причем вторая фаза подавляется индометацином и веществами, разрушающими ADP. В случае тромбоцитов человека для агрегации требуются значительно более высокие концентрации АГЭФХ. В связи с этим возникает вопрос: играет ли этот медиатор такую же важную роль у человека, как это имеет место у кроликов. Как описано ниже, при внутривенном введении кроликам АГЭФХ также наблюдается агрегация тромбоцитов и образование ТкВ2 in vivo, хотя неясно, освобождается ли в этой ситуации ТкВ2 именно из тромбоцитов.

Исследования на тромбоцитах кролика с использованием структурных аналогов АГЭФХ свидетельствуют о том, что для индукции агрегации существенны все три группы, связанные с глицерильным остовом. Замещение алкильной группы в первом положении сложным эфиром органической кислоты с той же длиной цепи приводит к падению активности в 250 раз. Природный аналог АГЭФХ с алкильной группой 16 : 0 в 5 раз активнее, чем 18 : 0 алкил-АГЭФХ 1213]. Замещение ацетильной группы во втором положении остатком масляной кислоты уменьшает активность примерно в 10 раз, тогда как лизо-АГЭФХ вообще неактивен даже в очень высоких концентрациях. Отщепление холина или ФХ приводит более чем к тысячекратному снижению активности. Мощные конкурентные ингибиторы связывания АГЭФХ, которые могли бы быть использованы для подавления его действия, в настоящее время не описаны.

Кроме действия на тромбоциты, АГЭФХ стимулирует также агрегацию нейтрофилов человека, причем для этого достаточно таких низких концентраций агента, как 0,1 нМ [427]. В присутствии цитохалазина В наблюдается также освобождение из нейтрофилов ферментов, содержащихся в специфических и азурофильных гранулах. При этом не наблюдается гибели клеток, а процесс секреции зависит от гликолиза. Ацетилглицерильный эфир ФХ также индуцирует Ч. В. Паркер

образование супероксида и хемотаксис нейтрофилов. Таким образом, АГЭФХ обладает сильным действием как на нейтрофилы, так и на тромбоциты. В то же время он не действует на тучные клетки и базофилы.

Быстрое внутривенное введение даже 2,5 мкг АГЭФХ взрослым кроликам приводит к почти немедленной нейтропении, тромбоцитопении, гипотении и к остановке дыхания, что вызывает гибель животного через несколько минут 1428]. При более низких, не летальных, дозах АГЭФХ уменьшение количества тромбоцитов в периферической крови является обратимым и содержание тромбоцитов в периферической крови возвращается к норме через пять минут, тогда как нейтропения продолжается не менее 30 мин. У выживших животных отмечается, кроме того, увеличение давления в легочной артерии и увеличение сопротивления при прохождении воздуха через дыхательные пути. Сходные изменения наблюдаются также у сенсибилизированных кроликов при летальной или нелетальной системной анафилаксии. Отсюда возникло предположение, что ФАТ является существенным компонентом реакции гиперчувствительности немедленного типа. Действительно в последнее время получены убедительные доводы в пользу того, что у кроликов АГЭФХ играет важную роль в опосредованной IgE системной анафилаксии. К сожалению, пока почти нет данных о роли АГЭФХ в системной анафилаксии у морских свинок или человека.

Некоторые из эффектов, наблюдающихся при введении ФАТ кроликам, по-видимому, обусловлены непосредственно им самим. Другие эффекты, вероятно, опосредованы тромбоцитами или содержащимися в них веществами, о чем свидетельствует отсутствие эффектов у животных с тромбоцитопенией, вызванной предварительным введением антител к тромбоцитам [429]. Некоторые из этих зависимых от тромбоцитов эффектов могут быть опосредованы ТкА3,: поскольку тромбоциты синтезируют значительное количество этого вещества, а содержание ТкВ2 в плазме существенно увеличивается при введении АГЭФХ. Тем не менее летальный эффект при внутривенном введении кроликам АГЭФХ, возможно, не обусловлен ТкА2, поскольку введение индометацина не защищает животных. При нелетальных реакциях снижение количества тромбоцитов в крови связано с тем, что они задерживаются в тканях, в частности в легких, и с образованием крупных агрегатов тромбоцитов, обнаруживаемых вмазках крови. Эти агрегаты могут вызывать резкое повышение давления в сосудах легких, что характерно для анафилаксии у кроликов.

Хотя действие внутривенного введения АГЭФХ на артериальное давление и кровоток через легкие особенно сильно, АГЭФХ может оказывать физиологически значимое действие и на реактивность сосудов кожи, а также сократимость гладких мышц [419—430]. Для индукции гиперемии и отека кожи человека требуется в 100—1000 раз более низкая молярная концентрация АГЭФХ, чем гистамина. Более того, низкие концентрации АГЭФХ вызывают пассивные кожные реакции у обезьян, кроликов, морских свинок и крыс. Реакции кожи человека не блокируются антагонистами гистамина, связывающимися с Ht-рецепторами; отсюда можно предположить, что АГЭФХ действует на тучные клетки опосредованно. В сравнительно высоких концентрациях (0,1—1 нМ) АГЭФХ вызывает медленный сократительный ответ в полосках подвздошной кишки морской свинки, причем этот эффект слабо обратим. Это наблюдение позволяет предположить, что АГЭФХ играет значительную роль в реакциях гиперчувствительности немедленного типа. Кроме того, как это уже обсуждалось, АГЭФХ может вносить существенный вклад в иммунный сложный гло-мерулонефрит у кроликов.

27. Медиаторы: высвобождение и функции ЛИТЕРАТУРА

1. Waksman В. Cellular hypersensitivity and immunity: Inflammation and cytotoxicity. In: Clinical Immunology, Parker C.W. (ed.), p. 173—218, Philadelphia, W.B. Saunders, 1980.

2. Meuer S., Zanker В., Hadding U., Bitter-Suermann D. Low zone desensitization: a stimulus-specific control mechanism of cell response, Ja Exp. Med., 155, 698 (1982).

3. Askenase P.W. Role of basophils, mast cells, and vasoamines in hypersensitivity reactions with a delayed time course, Prog. Allergy, 23, 119 (1977).

4. Sugiyama K., Utsumi K. Changes in membrane potential on histamine release from mast cells: Measurements with a fluorescent dye, Cell Struct. Funct., 4, 257—260 (1979).

5. Melmon K.L., Rocklin R.E., Rosenkranz R.P. Autocoids as modulators of the inflammatory and immune response, Am. J. Med., 71, 100—106 (1981).

6. Murphy P. The Neutrophil, Plenum Medical Book Company, New York, 1976.

7. Klebanoff S.J., Clark R.A. The Neutrophil, Elsevier/North Holland, New York, 1978.

8. Roos D. The metabolic response to phagocytosis. In: Cell Biology of Inflammation, ed. by G. Weissmann, p. 337, Elsevier/North Holland, Amsterdam, 1980.

9. Babior B.M. Oxygen-dependent microbial killing by phagocytes, N. Enel. J. Med., 298, 659-668 (1978).

10. Hoffstein S.I. Intra- and extracellular secretion from polymorphonuclear leukocytes. In: Cell Biology of Inflammation, ed. by G. Weissmann, p. 387, Elsevier/North Holland, New York, 1980.

11. Quie